Efeito imunomodulatório da suplementação preventiva do ácido graxo ômega-3 em um modelo animal da Síndrome da Dor Regional Complexa do tipo I
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Data
2020
Tipo de documento
Dissertação
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Área do conhecimento
Ciências da Saúde
Modalidade de acesso
Acesso embargado
Editora
Autores
Fernandes, Paula Franson
Orientador
Bobinski, Franciane
Coorientador
Martins, Daniel Fernandes
Resumo
Introduction: Complex Regional Pain Syndrome (CRPS) is known to present autonomic, sensory, motor and trophic clinical manifestations, triggered by a trauma or surgical process, and is established after an inflammatory process followed by the injury. It presents an increase of pro-inflammatory cytokines, and a decrease of anti-inflammatory and pro-resolutive cytokines. Omega-3, a fish oil rich in eicosapentaenoic acid (EPA) and docosaexaenoic acid (DHA), is known for its anti-inflammatory and pro-resolutive properties. Therefore, the objective of this study was to verify the effect of the preventive supplementation with omega-3 on the paw edema, in the concentrations of interleukin (IL)-4, IL-10, transforming growth factor β-1 (TGF-β1), tumor necrosis factor (TNF) and monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) in the skin and paw muscle and finally in the immunocontent of NOS 2 and CD86 (macrophages M1) and Arginase-1 (macrophages M2) in the paw muscle of mice submitted to the model of Chronic PostIschemia Pain (CPIP). Methodology: Swiss female mice were divided into 4 groups: (1) Saline/Sham; (2) Saline/CPIP; (3) Corn oil/CPIP and (4) Omega-3/CPIP. Saline (0.9%), corn oil (1.500 mg/Kg) or omega-3 (1.500 mg/Kg) were added for 30 days preventively and then, according to the two experimental protocols, until the 2nd or 15th day after CPIP. The CPIP model was performed by applying a tourniquet on the posterior right paw of the mice, inducing a process of ischemia and reperfusion. The evaluation of the leg thickness was used to follow the edema up to 96 hours after the injury. ELISA was used to measure pro- and anti-inflammatory cytokines and the Western Blotting assay for NOS 2 and CD86 and Arginase-1 immunomarkers. Results: Omega-3 decreased paw edema in injured animals, increased IL-4 concentrations in muscle after 48 hours, and increased IL-10 concentrations 15 days after IDP. The omega-3 did not change the concentrations of MCP-1, TNF and TGF-β1.48 hours after CPIP, as well as it did not change the levels of NOS 2, CD86 and Arginase-1. Conclusion: The results demonstrate a consistent immunomodulatory effect of preventive omega-3 supplementation in an animal model of CRPS-I.
Introdução: A Síndrome da Dor Regional Complexa (SDRC) é conhecida por apresentar manifestações clínicas autonômicas, sensoriais, motoras e tróficas, desencadeada por um trauma ou processo cirúrgico, e se estabelece após um processo inflamatório seguido de uma lesão. Apresenta um aumento de citocinas pró-inflamatórias, e uma diminuição das citocinas anti-inflamatórias e pró-resolutivas. O ômega-3, rico em ácido eicosapentaenoico (EPA) e ácido docosaexaenoico (DHA), é conhecido por suas propriedades anti-inflamatórias e pró-resolutivas. Sendo assim, o objetivo desse trabalhofoi verificar o efeito da suplementação preventiva com ômega-3 no edema da pata, nas concentrações da interleucina (IL)-4, IL-10, fator de crescimento transformador β-1 (TGF-β1), fator de necrose tumoral (TNF) e proteína quimioatrativa de monócitos 1 (MCP-1) na pele e músculo da pata e, por fim, no imunoconteúdo de NOS 2 e CD86 (macrófagos M1) e Arginase-1 (macrófagos M2) no músculo de camundongos submetidos ao modelo de Dor Pós-Isquemia Crônica (DPIC). Metodologia: Camundongos Swiss fêmeas foram divididos em 4 grupos: (1) Salina/Sham; (2) Salina/DPIC; (3) Óleo de milho/DPIC e (4) Ômega-3/DPIC. Foi realizada a suplementação com salina (0,9 %), óleo de milho (1.500 mg/Kg) ou ômega-3 (1.500 mg/Kg) por 30 dias preventivamente e, posteriormente conforme os dois protocolos experimentais, até o 2º ou 15º dias após a DPIC. O modelo de DPIC foi realizado pela aplicação de um torniquete na pata posterior direita dos camundongos, induzindo um processo de isquemia e reperfusão. A avaliação da espessura da pata foi utilizada para o acompanhamento do edema até 96 horas após a lesão. ELISA foi utilizado para mensuração das citocinas pró- e anti-inflamatórias e o ensaio de Western Blotting para a imunomarcação de NOS 2 e CD86 e Arginase-1. Resultados: O ômega-3 diminuiu o edema da pata dos animais lesionados, aumentou as concentrações de IL-4 no músculo após 48 horas, e ainda, aumentou as concentrações de IL-10, 15 dias após a DPIC. O ômega-3 não alterou as concentrações de MCP-1, TNF e TGF-β1,48 horas após a DPIC, assim como, não alterou os níveis de NOS 2, CD86 e Arginase-1. Conclusão: Os resultados demonstram um consistente efeito imunomodulatório da suplementação preventiva do ômega-3 em um modelo animal de SDRC-I.
Introdução: A Síndrome da Dor Regional Complexa (SDRC) é conhecida por apresentar manifestações clínicas autonômicas, sensoriais, motoras e tróficas, desencadeada por um trauma ou processo cirúrgico, e se estabelece após um processo inflamatório seguido de uma lesão. Apresenta um aumento de citocinas pró-inflamatórias, e uma diminuição das citocinas anti-inflamatórias e pró-resolutivas. O ômega-3, rico em ácido eicosapentaenoico (EPA) e ácido docosaexaenoico (DHA), é conhecido por suas propriedades anti-inflamatórias e pró-resolutivas. Sendo assim, o objetivo desse trabalhofoi verificar o efeito da suplementação preventiva com ômega-3 no edema da pata, nas concentrações da interleucina (IL)-4, IL-10, fator de crescimento transformador β-1 (TGF-β1), fator de necrose tumoral (TNF) e proteína quimioatrativa de monócitos 1 (MCP-1) na pele e músculo da pata e, por fim, no imunoconteúdo de NOS 2 e CD86 (macrófagos M1) e Arginase-1 (macrófagos M2) no músculo de camundongos submetidos ao modelo de Dor Pós-Isquemia Crônica (DPIC). Metodologia: Camundongos Swiss fêmeas foram divididos em 4 grupos: (1) Salina/Sham; (2) Salina/DPIC; (3) Óleo de milho/DPIC e (4) Ômega-3/DPIC. Foi realizada a suplementação com salina (0,9 %), óleo de milho (1.500 mg/Kg) ou ômega-3 (1.500 mg/Kg) por 30 dias preventivamente e, posteriormente conforme os dois protocolos experimentais, até o 2º ou 15º dias após a DPIC. O modelo de DPIC foi realizado pela aplicação de um torniquete na pata posterior direita dos camundongos, induzindo um processo de isquemia e reperfusão. A avaliação da espessura da pata foi utilizada para o acompanhamento do edema até 96 horas após a lesão. ELISA foi utilizado para mensuração das citocinas pró- e anti-inflamatórias e o ensaio de Western Blotting para a imunomarcação de NOS 2 e CD86 e Arginase-1. Resultados: O ômega-3 diminuiu o edema da pata dos animais lesionados, aumentou as concentrações de IL-4 no músculo após 48 horas, e ainda, aumentou as concentrações de IL-10, 15 dias após a DPIC. O ômega-3 não alterou as concentrações de MCP-1, TNF e TGF-β1,48 horas após a DPIC, assim como, não alterou os níveis de NOS 2, CD86 e Arginase-1. Conclusão: Os resultados demonstram um consistente efeito imunomodulatório da suplementação preventiva do ômega-3 em um modelo animal de SDRC-I.
Palavras-chave
Ômega-3, PUFAs, Síndrome da Dor Regional Complexa, Edema, Citocinas