Petronilho, FabríciaJoaquim, Larissa da Silva2019-12-112020-11-262019-12-112020-11-262019https://repositorio.animaeducacao.com.br/handle/ANIMA/3123Introduction: Sepsis is one of the leading causes of mortality in intensive care units, besides causing acute brain dysfunction, is associated with long-term neurocognitive consequences. Evidences has suggested that the microglial activation and mitochondrial dysfunction are involved in brain dysfunction after sepsis but understanding molecular mechanisms and therapies a major challenge. Given the emerging role of Stanniocalcin-1 (STC-1) a intracrine protein internalized to the mitochondria, and responsible to diminishes superoxide generation through induction of Mithocondrial Uncoupling Proteins-2 (UCP-2) and inflammatory responses, we hypothesized that STC-1 may modulate inflammatory response and UCP-2 expression after microglial activation and attenuate mitochondrial dysfuntion in sepsis. Objective: To evaluate the effect of STC-1 on microglial activation and mitohondrial injury in sepsis. Methods: The microglial cell culture was exposed to LPS (10 μg / ml) and RhSTC-1 at 1, 10, 100, 500 and 1000 ng / ml and cell viability, TNF-α, IL-1β, IL-6, IFN-γ, IL-2, IL-13, IL-10 and IL-18 levels and UCP-2 mRNA expression were evaluated. Sepsis was induced in male Wistar rats using Cecal Ligation and Puncture (CLP), and control rat underwent (sham) surgery. RhSTC-1 (20, 50 and 100 ng / kg) was administered intracerebroventricularly. Twenty-four hours after CLP, hippocampus was obtained and assayed for mitochondrial respiratory chain and Creatine kinase (CK) activity. Results: STC-1 increase cell viability, decreased TNF-α, IL-1β, IL-6, IFN-γ levels and did not interfered in UCP-2 level in microglial cells. In rats, STC-1 at the highest doses restored complex I, II and CK activity after in sepsis the hippocampus. Conclusion: Our data provide the first experimental demonstration that STC-1 was able to reduce the neuroinflammation in vitro and sepsis-induced brain dysfunction in rats by decreasing mitochondrial dysfunction and CK activity alteration.Introdução: A sepse é uma das principais causas de mortalidade em unidades de terapia intensiva, além de causar disfunção cerebral aguda, está associada a consequências neurocognitivas em longo prazo. Evidências sugerem que ativação microglial e disfunção mitocondrial estão envolvidas na disfunção cerebral na sepse, mas entender os mecanismos moleculares e terapias é um grande desafio. Dado o papel emergente da Staniocalcina-1 (STC-1), proteína intrácrina internalizada nas mitocôndrias, responsável por diminuir geração de superóxido por indução da Proteína Mitocondrial de Desacoplamento-2 (UCP-2) e respostas inflamatórias, hipotetiza-se que STC-1 modula resposta inflamatória e expressão UCP-2 após ativação microglial e atenua disfunção mitocondrial na sepse. Objetivo: Avaliar o efeito da STC-1 sobre a ativação microglial e injúria mitocondrial na sepse. Métodos: A cultura celular microglial foi exposta a LPS (10 μg / ml) e RhSTC-1 a 1, 10, 100, 500 e 1000 ng / ml e viabilidade celular, TNF-α, IL-1β, IL-6, IFN-γ, IL-2, IL-13, IL-10 e IL-18 e expressão de mRNA da UCP-2 foram avaliados. A sepse foi induzida em ratos Wistar machos usando Ligação e Perfuração Cecal (CLP), e o controle (SHAM). RhSTC-1 (20, 50 e 100 ng / kg) foi administrado por via intracerebroventricular. Vinte e quatro horas após CLP, o hipocampo foi obtido e analisado quanto a atividade da cadeia respiratória mitocondrial e da Creatina Quinase (CK). Resultados: A STC-1 aumenta a viabilidade celular, diminui níveis de TNF-α, IL-1β, IL-6, IFN-γ e não interfere no nível UCP-2 nas células microgliais expostas a LPS. Em ratos, STC-1, nas doses mais altas, restaura atividade hipocampal do complexo I, II e CK após sepse. Conclusão: Os resultados fornecem a primeira demonstração experimental de que STC-1 foi capaz de reduzir a neuroinflamação in vitro e a disfunção cerebral induzida por sepse em ratos, diminuindo disfunção mitocondrial e alteração da atividade da CK.90 f.pt-BRAttribution-NoDerivs 3.0 BrazilSepseMicrógliaStaniocalcina-1MitocôndriaDissertação